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RT-PCR服務，逆轉錄PCR技術服務
逆轉錄PCR技術服務
世聯博研生命科學服務中心為客戶提供you質的逆轉錄PCR技術服務。
逆轉錄PCR的指數擴增是一種很靈敏的技術，可以檢測很低拷貝數的RNA。逆轉錄PCR廣泛應用于遺傳病的診斷，并且可以用于定量監測某種RNA的含量。
逆轉錄PCR的關鍵步驟在是RNA的反轉錄，要求RNA模版為完整的且不含DNA、蛋白質等雜質。RT-PCR有時候也會指代實時PCR(real-time PCR)。為了與逆轉錄PCR相區別，通常被寫作“定量PCR”(quantitative PCR，QT-PCR)或者RTQ-PCR(real-time quantitative PCR)。
收費標準
1.當標本個數>5個時，收費標準為每個標本每個指標80元，內參免費；
2.當標本個數≤5個時，收費標準按照5個標本計算；計算方法如上；
3.標本大于50個以上并且指標較多時，收費標準可另行商議。
A.RNA抽提(總RNA提取)：20份以下每份樣品80元，超過20份每份60元，低收費1200元。
B.RT-PCR:20份以下每份樣品80元，超過20份每份60元，低收費1200元。
C.PCR:20份以下每份樣品50元，超過20份每份35元，低收費1000元。
服務周期
1~2周，根據樣品情況而定。
客戶須知（對材料的要求、注意事項）
1.客戶須在實驗開始前確保其提供材料的數量和質量，并提供相關信息。
A.客戶需提供盡量多的新鮮樣品（組織：100-200 mg或直接提供純化好的總RNA 5 μg/樣本）。動物組織離體后必須立即用生理鹽水清洗，時間不超過10min，馬上用一次性塑料手套或鋁箔包好凍入液氮中，-70℃低溫冰箱保存；植物組織必須保證新鮮，用液氮速凍后放入-70℃低溫冰箱保存；細胞為培養瓶培養。同時請避免樣品儲存時間過長，有融化或者溶解。
B.可直接提供Total RNA，要保證沒有降解，要求總RNA＞500μg，濃度＞1μg/μl；mRNA＞3 μg，濃度＞50 ng/μl；OD260/OD280值≥1.8，以我公司電泳膠圖、紫外分析儀定量檢測為準。引物長度及G、C含量，引物若為干粉，請提供引物的準確量；若為稀釋液，請提供引物的終濃度（每個反應所需的引物滿足以下要求：濃度≥10pm/ml，體積≥10ml）。（引物也可由我公司提供，費用另計。）
C.建議由我方提取RNA；如果客戶提供RNA樣品，由樣品質量產生的任何問題，其損失和責任應由樣品提供方承擔。
2.本公司在收到客戶提供的研究材料后的弟二個工作日起開始實驗。
3.實驗結束后，本公司將結果及時發給客戶：
A.cDNA
B. PCR產物
C.實驗報告（包括實驗方法、照片等）。
服務程序
1.可在我公司網站內直接填寫《RT-PCR服務訂單》發至我公司郵箱。
2.可下載訂單，填寫完成后，用傳真的形式發到我公司。
3.可電話聯系詳談有關具體要求和服務內容。
4.簽訂《RT-PCR服務合同》，預付實驗總費用的50%作為實驗預付款。
5.寄送：委托單位的試驗材料和試劑等均須采用te快專遞形式郵寄，有低溫要求的、固定要求的，按低溫保存、固定防碎方法運輸，以確保實驗物品的安可靠。
6.實驗結束后，本公司將結果及時發給客戶，同時根據客戶要求處理相關材料。
7.客戶應對所提供的材料及信息負責，如因客戶提供的材料及信息不準確而引起的實驗延誤或經濟損失由客戶承擔。
服務咨詢及技術支持
·電話:
服務項目簡介
逆轉錄聚合酶鏈式反應的原理：提取組織或細胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，采取Oligo(dT)或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA。再以cDNA為模板進行PCR擴增，從而獲得目的基因或檢測基因表達。該技術通過循環擴增，提高了其檢測的靈敏度。主要用于分析基因的轉錄產物、獲取目的基因、合成cDNA探針、構建RNA高效轉錄系統等。
技術步驟
- RNA抽提
- cDNA鏈合成
- 用目的基因上下游引物進行PCR反應
- 電泳檢測PCR產物
應用實例
FAQ（Frequently Asked Questions）
1. 逆轉錄PCR可以用于定量檢測基因的表達水平嗎？如果可以，如何檢測分析？
逆轉錄PCR可以用于半定量檢測基因的表達水平，半定量逆轉錄PCR是一種簡捷、快速、te異的定量RNA 測定方法, 通過mRNA 反轉錄成cDNA , 再進行PCR 擴增, 擴增產物以指數形式增長, 通過測定PCR 產物的數量, 就可以推測各樣品中te異mRNA 的相對含量。逆轉錄PCR服務可以用于基因調取嗎？
在進行目的蛋白的表達、構建表達載體等實驗時，通常需要獲得一段目的基因。我們可以根據您提供的已知參考序列（NCBI上已發表)，以基因組DNA或總RNA為模板，獲取您所需要的某個區域的一段基因。
2. 怎樣對合成DNA/RNA制品進行定量
由于核酸在260 nm附近有強吸收，因此常根據此性質，用紫外分光光度計測定核酸溶液在260 nm的吸光度值，據此對核酸進行定量，用OD值來表示。
