高通量顆粒表征鑒別鑒定系統

●顆粒子ID鑒定
●5 ?L-10 mL樣品量
●1分鐘/樣本
●100％采樣 

wu論您在生物工藝流程中的哪個位置，該系統都能提供亞微顆粒準確、定量的大小、數量、形態和ID。 是否需要確切地知道哪些粒子是蛋白質而哪些不是蛋白質？ 

是否希望每次測試僅用5 ?L篩查許多不同的制劑？  是否需要對10 mL大量釋放樣品進行質量控制？ 沒問題，該系統可以做到。

該系統還會自動分析您的數據，并向您顯示找到的每個粒子的圖片。

該顆粒分析平臺，可讓您更快地獲得佳配方。 它結合了熒光膜顯微鏡（FMM）技術和背景成像（BMI）技術，為您提供了一個小體積，高通量的系統，該系統可以計算蛋白質的大小，大小和ID。 翻譯？ 現在，您可以盡早在潛在客戶優化和配方前測試中篩查顆粒，從而更早地獲得關鍵的藥物穩定性見解，從而減少開發風險并縮短上市時間。

僅可在以后更新的僅明場系統，可為您提供明場并檢測ThT標記的蛋白聚集體的1通道熒光系統，或可添加額外熒光的2通道熒光系統 引導到您的系統。 可以對您的樣品進行100％的計數和測量，因此樣品的聚焦度和流速永遠不會偏向您的數據？ 永遠不用擔心會丟失什么！ 

為什么選擇該系統？

通過使用硫黃素T（一種與蛋白質聚集體特異性結合的熒光染料），在穩定性分析和污染物檢測中確定性地確定您的顆粒是否為蛋白質。

2、可靈活選擇的熒光標記
獲得確定配方中其他顆粒所需的靈活性。 在TMA，Bodipy，DiI的通道之間進行選擇，以識別疏水性實體或特定于您的過程的其他分子。 看不到您想要的頻道嗎？ 選擇您自己的自定義激發和發射！ 

3、只有該系統才能測量100％的樣品，并將顆粒保持在同一焦點平面上。 立即獲得準確的計數，而不必優化幀速率和流率。 

4、quan自動化
提高效率的 96孔膜板不僅與液體處理器兼容，而且該系統也與機器人wanquan兼容。

5、可分析顆粒范圍大：
顆粒范圍：1 ?m – 5 mm 

蛋白質/非蛋白質ID
通過熒光檢測區分蛋白質和非蛋白質顆粒。
高濃度樣品
是抗體顆粒分析或任何具有高粘度和高折射率的有限材料樣品的里想選擇。
粒子分類
區分降解的聚山梨酸酯顆粒，蛋白質硅油聚集體，玻璃，塑料，纖維，聚集的蛋白質等等！
分析開發與質量控制
顆粒識別有助于取證。 提供21 CFR Part 11軟件。

為什么要使用該系統進行病毒載體質量評估
檢測并鑒定未通過DLS或SEC測量的顆粒
低樣品消耗（每次測試低至5μL）
96孔格式，用于測試許多條件
提供有關顆粒的詳細信息-大小，形態，數量，分布
每個樣品的快速分析時間約為1分鐘
寬廣的工作范圍：可高重復性地測量1 ?m至5 mm的顆粒
對顆粒進行成像，不受緩沖液或基質的干擾，從而獲得更高的靈敏度
高分辨率粒子圖像
根據應力和溶液條件檢測變化的靈敏度
提供21 CFR Part 11軟件 

典型應用：

一、AAV分析–超小體積AAV聚合定量和鑒定

腺相關病毒（AAV）通過實現靶向治療性遺傳有效載荷的定向傳遞，已經改變了基因療法。作為非腸道給藥的藥物，基因療法必須經過FDA要求的蛋白質療法相同的嚴格安quan性測試。這包括通過監測亞可見顆粒（SVP）的形成來表征AAV載體的穩定性，該亞可見顆粒也可能導致不良的免疫原性事件。然而，可用的AAV材料的數量受到限制，因為其生產昂貴，費時且勞動強度大。

該系統平臺是超低容量，亞可見顆粒分析系統，可定量和鑒定低至5 ?L的AAV聚集體，與流動成像方法相比，可節省大量寶貴的樣品。

亞可見粒子計數是AAV穩定性的指標
亞可見粒子測量是一種穩定性預測因子，可大程度地降低風險，并使您能夠更明智地做出有關病毒載體制劑和質量評估的決策。 Aura系統上的背景膜成像（BMI）可檢測諸如凍融循環，離子強度和不同添加劑之類的參數如何影響AAV載體的穩定性，從而確定基因治療產品的佳配方和儲存條件。

不同離子強度條件下AAV載體的穩定性
離子強度對AAV樣品中不溶性聚集體形成的影響。隨著應力的增加，可以檢測到更高的顆粒數。

多輪凍融后的AAV載體穩定性
凍融循環對AAV樣品中不溶性聚集物形成的影響。隨著應力的增加，可以檢測到更高的顆粒數。

添加不同添加劑后的AAV矢量穩定性
不同添加劑對應力后AAV樣品中不溶性聚集物形成的影響。

2、比較AAV血清型在熱應力下的穩定性
通過選擇佳的AAV血清型來包裝您的遺傳有效載荷，從而開始您的基因療法開發。使用Aura上的BMI進行的明場成像可提供高度分辨的圖像，使您可以比較不同血清型的原種樣品中SVP的水平，并根據熱應力（73°C，2小時）后的形態對每種血清型形成的聚集體類型進行分類。然后可以使用Particle Vue軟件對數據進行定量。

監視和分類在熱應力AAV2樣品中形成的聚集體的類型
在庫存的AAV2樣品中觀察到低水平的SVP。熱應力后會形成定義明確的大小顆粒。


監視和分類在熱應力AAV5樣品中形成的聚集體的類型
與庫存AAV2樣品相比，在庫存AAV5樣品中觀察到SVP含量增加。熱應力后形成大的原纖維結構。


監視和分類在熱應力AAV5樣品中形成的聚集體的類型
與庫存AAV2和AAV5樣品相比，在庫存AAV8樣品中觀察到SVP含量增加。隨著應力的AAV8樣品變性成膜狀基質，觀察到樣品wanquan降解。

定量分析熱應力AAV2，AAV5和AAV8樣品中的聚集體形成。
使用Particle Vue軟件對有和沒有熱應激的不同AAV血清型的定量計數。

3、明確確認檢測到的SVP為聚集衣殼
上面研究的三種血清型中穩定的AAV2樣品在不同條件下受到壓力，并結合使用明場（BMI）和熒光（熒光膜顯微鏡– FMM）進行分析。樣品用硫黃素T（ThT）染色，這是一種熒光染料，可以與聚集的蛋白質特異性結合，但不能與非蛋白質顆粒結合，后者可以源自塑料，橡膠或降解的添加劑。

wu應力AAV2樣品中的衣殼聚集
在來自Aura的組合明場（非蛋白質，藍色）和熒光（蛋白質，紅色）圖像中，未受應力的AAV2樣品的庫存中沒有衣殼聚集現象。

熱應激AAV2樣品中的衣殼聚集
在來自Aura的組合明場（非蛋白質，藍色）和熒光（蛋白質，紅色）圖像中，觀察到熱應激AAV2樣品中衣殼高度聚集。

與ETFE混合的wu應力AAV2樣品中的衣殼聚集。
在來自Aura的明場圖像（非蛋白質，藍色）和熒光圖像（蛋白質，紅色）的組合圖像中，觀察到了wu應力AAV2與塑料ETFE混合后的非蛋白質聚集體。

旋轉應力作用下AAV2樣品中的衣殼聚集
在來自Aura的組合明場（非蛋白質，藍色）和熒光（蛋白質，紅色）圖像中，在AAV2旋轉樣品中觀察到的衣殼聚集非常少，非蛋白質聚集較少。

AAV2樣品中的衣殼聚集受到多個凍融循環的影響
AAV2樣品中的衣殼聚集水平非常低-凍融

二、生物制劑–配方開發
亞可見顆粒是生物藥物的關鍵質量指標
監測生物藥物開發過程中的蛋白質穩定性至關重要，因為聚集體會限制產品的保質期，并且是治療潛在的免疫原性威脅的主要指標。 因此，FDA建議“應在產品開發中盡早制定出盡量減少聚集物形成的策略” 1和“應評估治療劑中存在的亞可見顆粒（2–10μm）的范圍和水平” 1 USP <787>和USP <788>為腸胃外給藥的亞可見顆粒計數提供了特定的法規指導。
亞可見粒子落入一個du特的大小范圍：對于DLS來說太大，對于SEC來說太大，對于通過肉眼進行視覺分析來說太小

為什么使用該系統進行生物制劑的開發：

樣品消耗量低（每次測試低至5μL），因此可以進行多次測量并取平均值
更高的通量，可測試多種配方和條件
提供有關顆粒的詳細信息-大小，形態，數量，分布
快速分析時間
寬廣的工作范圍：可高重復性地測量1 ?m至5 mm的顆粒
對顆粒進行成像，不受緩沖液或基質的干擾，從而獲得更高的靈敏度
人性化的軟件界面
粒子的質量圖像
定量非均質粒子群（大小，密度，形態）
根據應力和溶液條件檢測變化的靈敏度
蛋白質/非蛋白質ID 

三、生物制劑–后期制劑
亞可見顆粒是生物藥物的關鍵質量指標
在制造過程的任何階段或運輸和存儲過程中，亞可見蛋白聚集體均可形成，這是由氧化，機械應力，雜質，pH值變化，溫度變化，設備界面等觸發的。
亞可見粒子落入一個du特的大小范圍：對于DLS來說太大，對于SEC來說太大，對于通過肉眼進行視覺分析來說太小。 

為何將該系統用于下游配方：
滿足您要求的樣品量
更高的通量，可測試多種配方和條件
提供有關顆粒的詳細信息-大小，形態，數量，分布
快速分析時間
寬廣的工作范圍：可高重復性地測量1 ?m至5 mm的顆粒
人性化的軟件界面
粒子的質量圖像
定量非均質粒子群（大小，密度，形態）
根據應力和溶液條件檢測變化的靈敏度
區分不同類型顆粒的能力
提供CFR Part 11軟件 

四、顆粒鑒別

1小時內即可完成96個樣品的簡單，快速和quan自動亞可見顆粒表征和ID
A該系統是世界上使用熒光膜顯微鏡（FMM）來檢測帶有熒光染料標記的顆粒的顆粒分析儀，因此您將確切了解配方中的成分。 這意味著如果您的粒子分類錯誤，您將不會浪費大量的時間和金錢來尋找解決方案。
使用該儀器隨附的標準熒光通道，找出您的顆粒是否為蛋白質。 如果您想進一步了解樣品，還可以添加其他熒光通道。
熒光膜顯微鏡：

紅色–蛋白質聚集體 

黑色–非蛋白質顆粒 

綠色–降解的聚山梨酯 

藍色–側面照明模式（SIMI）

熒光膜顯微鏡（FMM）與該系、系統上的背景膜成像（BMI）配合使用，可以準確地告訴您配方中的成分。它利用與特定粒子群特異性結合的熒光染料進行簡單而確定的鑒定，而這并不取決于可能會引起誤解的形態和強度數據。用硫黃素T對樣品染色，以區分聚集蛋白和非蛋白顆粒，和/或用其他染料染色，以區分降解的賦形劑和其他親脂性分子，從而獲得更多見解。

膜相染色和溶液相染色均與Aura兼容，因此您可以選擇適合您的工作流程的方法。要進行膜相染色，只需執行BMI所需的正常步驟即可。然后，向板上添加40 ?L染料，施加真空，然后進行FMM測量。溶液相染色非常簡單，您只需將熒光染料與樣品在試管中混合，然后將其應用于背景板并進行BMI和FMM測量即可。完成后，我們的軟件將自動對齊生成的圖像，以便您可以直接進入分析。

系統熒光通道選項 ：

五、小分子–通過看不見的東西開發更好的藥物

溶解度測量的另一種方法
小分子化合物的水溶性是藥物發現和開發中的重要參數。 低溶解度會影響生物學分析，從而導致效力和毒性被低估，SAR不準確，并且難以解釋ADME結果。 盡管在早期階段具有至關重要的意義，但用于溶解度測量的常用檢測方法效率低下，缺乏靈敏度或對樣品處理敏感。

該系統與背景執行膜成像（BMI）是可以通過一個簡單的和靈活的工作流測量在高通量化合物溶解度亞可見粒子分析系統。 此外，高度解析的顆粒圖像可提供有關沉淀的固體形態的有價值的信息，以進行更quan面的溶解度表征。

為什么將該系統用于小分子ADME研究？
常用的早期溶解度測量方法有局限性
效率低下（過濾+ LC-MS / HPLC），對于較小的項目不靈活
缺乏靈敏度（光散射/比濁法）
受到溶劑和基質雜質的干擾（LC-MS，紫外光譜）
BMI是易于使用的靈活解決方案，可支持早期的ADMET工作流程
比濁度法更靈敏
比質譜或HPLC檢測更快，更輕松，更靈活
干法測量wu基質干擾
粒子圖像可提供有關固態形式（晶體與非晶態）的有價值的信息