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免疫沉淀服務(IP)
服務項目簡介
在細胞生物學研究中，有些靶蛋白表達水平不高，難以用免疫印跡的方法檢測到。為此可用te異性識別靶蛋白的抗體進行免疫沉淀
，純化和富集靶抗原。免疫沉淀可以從可溶性分子的復雜混合物中純化te定的抗原，通常為蛋白質(zhì)。免疫沉淀常用于測量蛋白質(zhì)抗
原的相對分子質(zhì)量，監(jiān)控其翻譯后修飾，研究蛋白質(zhì)的半衰期等。
技術步驟
①離心收集細胞，PBS洗滌2次。細胞用量根據(jù)目的蛋白表達的水平而定。
②按1×107細胞/mL加入細胞裂解液，于冰浴上超聲破碎。
③4℃，12,000 g離心10 min，取上清。
④上清中加入50 μL 的蛋白A/G-agarose,于4 ℃在搖床上溫和搖1-3 h，進行預清除。
⑤12,000 g離心30 s，取上清。
⑥將上清等分2份，補加稀釋液至1 mL，其中一份加入1-10 μg識別目的蛋白的抗體，另一份加入等量的對照抗體，于4℃在搖床上
溫和搖2 h，然后加入50 μL 的蛋白A/G-agarose,于4℃在搖床上溫和搖過夜。
⑦離心棄上清，清洗沉淀4次。
⑧Western blot進行定性和定量檢測。
應用實例
1．未免疫沉淀富集過的樣品
2．抗體免疫沉淀富集過的樣品
服務周期
我公司在接受實驗委托2~3周內(nèi)完成實驗并交付實驗報告。
客戶須知
需提供te異性一抗及其來源說明。
