| 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)/技術(shù)服務(wù)導(dǎo)航 | |||||||
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| 新藥研發(fā)CRO | |||||||
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細(xì)胞增殖檢測(cè)服務(wù)
應(yīng)用領(lǐng)域
MTT比色法能定量檢測(cè)細(xì)胞的增殖與生長(zhǎng)。已經(jīng)在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)的許多研究領(lǐng)域中用于檢測(cè)細(xì)胞毒性、細(xì)胞活性和細(xì)胞增殖試驗(yàn)。
收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)
實(shí)驗(yàn)名稱(chēng) |
實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 |
客戶提供材料 |
服務(wù)期限 |
提交結(jié)果 |
服務(wù)報(bào)價(jià) |
細(xì)胞增殖檢測(cè) （MTT法） |
體外藥敏檢測(cè) |
細(xì)胞 藥品 |
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù) 實(shí)驗(yàn)報(bào)告 |
面議 |
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5株正常細(xì)胞株 |
藥品 |
3周 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告 |
4000元/ 樣品 |
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5株腫瘤細(xì)胞株 （細(xì)胞由客戶自選） |
藥品 |
3周 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告 |
4000元/ 樣品 |
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5株耐藥細(xì)胞株 |
藥品 |
3周 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告 |
5000元/ 樣品 |
服務(wù)周期
我公司在正式接受實(shí)驗(yàn)委托5~6周左右完成實(shí)驗(yàn)并交付實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
客戶須知（對(duì)材料的要求、注意事項(xiàng)）
1.客戶須在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前確保其提供材料的數(shù)量和質(zhì)量，并提供相關(guān)信息：
樣本的介紹；
相關(guān)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)內(nèi)容如藥物處理時(shí)間、樣本濃度等。
2.本公司在收到客戶提供的研究材料后的弟二個(gè)工作日起開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。
服務(wù)程序
1.可在我公司網(wǎng)站內(nèi)直接填寫(xiě)《細(xì)胞增殖檢測(cè)服務(wù)訂單》發(fā)至我公司郵箱。
2.可下載訂單，填寫(xiě)完成后，用傳真的形式發(fā)到我公司。
3.可電話聯(lián)系詳談?dòng)嘘P(guān)具體要求和服務(wù)內(nèi)容。
4.簽訂《細(xì)胞增殖檢測(cè)服務(wù)合同》，預(yù)付實(shí)驗(yàn)總費(fèi)用的50%作為實(shí)驗(yàn)預(yù)付款。
5.寄送：委托單位的試驗(yàn)材料和試劑等均須采用te快專(zhuān)遞形式郵寄，有低溫要求的、固定要求的，按低溫保存、固定防碎方法運(yùn)輸，以確保實(shí)驗(yàn)物品的安可靠。
6.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，本公司將結(jié)果及時(shí)發(fā)給客戶，同時(shí)根據(jù)客戶要求處理相關(guān)材料：
原始數(shù)據(jù)；
實(shí)驗(yàn)報(bào)告（包括實(shí)驗(yàn)流程，材料和方法等）。
7.客戶應(yīng)對(duì)所提供的材料及信息負(fù)責(zé)，如因客戶提供的材料及信息不準(zhǔn)確而引起的實(shí)驗(yàn)延誤或經(jīng)濟(jì)損失由客戶承擔(dān)。
服務(wù)咨詢及技術(shù)支持
電話:
Email:SLBY800@163.COM
服務(wù)項(xiàng)目簡(jiǎn)介
MTT比色法，是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法。其檢測(cè)原理為活細(xì)胞內(nèi)線粒體中的琥珀酸脫氫酶能催化外源性無(wú)色的MTT形成藍(lán)色的結(jié)晶Formazan，并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無(wú)此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細(xì)胞中的Formazan，用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在一定波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。
該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測(cè)、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)、以及腫瘤放射敏感性測(cè)定等。它的特點(diǎn)是靈敏度高、經(jīng)濟(jì)。
技術(shù)步驟
1.接種細(xì)胞：收集對(duì)數(shù)期細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞懸液濃度，每孔加入100ul,鋪板使待測(cè)細(xì)胞調(diào)密度至1000~10000孔，邊緣孔用無(wú)菌PBS填充。
2.細(xì)胞培養(yǎng)：5% CO2，37℃孵育，至細(xì)胞單層鋪滿孔底（96孔平底板）。
3.藥物處理：加入濃度梯度的藥物，原則上，細(xì)胞貼壁后即可加藥，或兩小時(shí)，或半天時(shí)間，但我們常在前一天下午鋪板，次日上午加藥.一般5~7個(gè)梯度，每孔100ul，設(shè)3~5個(gè)復(fù)孔。
4.呈色：5% CO2，37℃孵育16~48小時(shí)，倒置顯微鏡下觀察。每孔加入20ul MTT溶液（5mg/ml，即0.5% MTT），繼續(xù)培養(yǎng)4h。若藥物與MTT能夠反應(yīng)，可先離心后棄去培養(yǎng)液，小心用PBS沖2~3遍后，再加入含MTT的培養(yǎng)液。
5.溶解：終止培養(yǎng)，小心吸去孔內(nèi)培養(yǎng)液。對(duì)于懸浮細(xì)胞需要離心后再吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液。每孔加入150ul二甲基亞砜，置搖床上低速振蕩10min，使結(jié)晶物充分溶解。
6.比色：在酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀OD490nm處測(cè)量各孔的吸光值，記錄結(jié)果，以時(shí)間為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。同時(shí)設(shè)置調(diào)零孔（培養(yǎng)基、MTT、二甲基亞砜），對(duì)照孔（細(xì)胞、相同濃度的藥物溶解介質(zhì)、培養(yǎng)液、MTT、二甲基亞砜）。
應(yīng)用實(shí)例
FAQ（Frequently Asked Questions）
1. 藥品的詳細(xì)信息可以保密嗎？
可以，只需要提供給我們藥物的分子量等必需信息。
2. 網(wǎng)站上的價(jià)格：4000元/樣品，指的是每用一種藥物處理5株細(xì)胞的價(jià)格，還是每用一種藥物處理1株的價(jià)格？
指的是每用一種藥物處理5株細(xì)胞的價(jià)格,詳細(xì)情況請(qǐng)來(lái)電咨詢。
3. 貴公司的細(xì)胞增殖檢測(cè)服務(wù)只能用MTT法檢測(cè)嗎？能否用其他檢測(cè)方法？
用MTT法，也可以用其他方法，價(jià)錢(qián)另計(jì)。
4. 藥物檢測(cè)時(shí)，每種細(xì)胞株的一般采用幾個(gè)平行？對(duì)照又是怎么處理的，以及相應(yīng)采用幾個(gè)平行？
藥物實(shí)驗(yàn)每個(gè)濃度一般做3個(gè)平行，對(duì)照也保證有一定的復(fù)孔數(shù)。
