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細胞增殖檢測服務
應用領域
MTT比色法能定量檢測細胞的增殖與生長。已經在生物學和醫學的許多研究領域中用于檢測細胞毒性、細胞活性和細胞增殖試驗。
收費標準
實驗名稱 |
實驗內容 |
客戶提供材料 |
服務期限 |
提交結果 |
服務報價 |
細胞增殖檢測 （MTT法） |
體外藥敏檢測 |
細胞 藥品 |
實驗數據 實驗報告 |
面議 |
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5株正常細胞株 |
藥品 |
3周 |
實驗報告 |
4000元/ 樣品 |
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5株腫瘤細胞株 （細胞由客戶自選） |
藥品 |
3周 |
實驗報告 |
4000元/ 樣品 |
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5株耐藥細胞株 |
藥品 |
3周 |
實驗報告 |
5000元/ 樣品 |
服務周期
我公司在正式接受實驗委托5~6周左右完成實驗并交付實驗結果。
客戶須知（對材料的要求、注意事項）
1.客戶須在實驗開始前確保其提供材料的數量和質量，并提供相關信息：
樣本的介紹；
相關實驗設計內容如藥物處理時間、樣本濃度等。
2.本公司在收到客戶提供的研究材料后的弟二個工作日起開始實驗。
服務程序
1.可在我公司網站內直接填寫《細胞增殖檢測服務訂單》發至我公司郵箱。
2.可下載訂單，填寫完成后，用傳真的形式發到我公司。
3.可電話聯系詳談有關具體要求和服務內容。
4.簽訂《細胞增殖檢測服務合同》，預付實驗總費用的50%作為實驗預付款。
5.寄送：委托單位的試驗材料和試劑等均須采用te快專遞形式郵寄，有低溫要求的、固定要求的，按低溫保存、固定防碎方法運輸，以確保實驗物品的安可靠。
6.實驗結束后，本公司將結果及時發給客戶，同時根據客戶要求處理相關材料：
原始數據；
實驗報告（包括實驗流程，材料和方法等）。
7.客戶應對所提供的材料及信息負責，如因客戶提供的材料及信息不準確而引起的實驗延誤或經濟損失由客戶承擔。
服務咨詢及技術支持
電話:
Email:SLBY800@163.COM
服務項目簡介
MTT比色法，是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞內線粒體中的琥珀酸脫氫酶能催化外源性無色的MTT形成藍色的結晶Formazan，并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的Formazan，用酶聯免疫檢測儀在一定波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數量。在一定細胞數范圍內，MTT結晶形成的量與細胞數成正比。
該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗、以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經濟。
技術步驟
1.接種細胞：收集對數期細胞，調整細胞懸液濃度，每孔加入100ul,鋪板使待測細胞調密度至1000~10000孔，邊緣孔用無菌PBS填充。
2.細胞培養：5% CO2，37℃孵育，至細胞單層鋪滿孔底（96孔平底板）。
3.藥物處理：加入濃度梯度的藥物，原則上，細胞貼壁后即可加藥，或兩小時，或半天時間，但我們常在前一天下午鋪板，次日上午加藥.一般5~7個梯度，每孔100ul，設3~5個復孔。
4.呈色：5% CO2，37℃孵育16~48小時，倒置顯微鏡下觀察。每孔加入20ul MTT溶液（5mg/ml，即0.5% MTT），繼續培養4h。若藥物與MTT能夠反應，可先離心后棄去培養液，小心用PBS沖2~3遍后，再加入含MTT的培養液。
5.溶解：終止培養，小心吸去孔內培養液。對于懸浮細胞需要離心后再吸棄孔內培養上清液。每孔加入150ul二甲基亞砜，置搖床上低速振蕩10min，使結晶物充分溶解。
6.比色：在酶聯免疫檢測儀OD490nm處測量各孔的吸光值，記錄結果，以時間為橫坐標，吸光值為縱坐標，繪制細胞生長曲線。同時設置調零孔（培養基、MTT、二甲基亞砜），對照孔（細胞、相同濃度的藥物溶解介質、培養液、MTT、二甲基亞砜）。
應用實例
FAQ（Frequently Asked Questions）
1. 藥品的詳細信息可以保密嗎？
可以，只需要提供給我們藥物的分子量等必需信息。
2. 網站上的價格：4000元/樣品，指的是每用一種藥物處理5株細胞的價格，還是每用一種藥物處理1株的價格？
指的是每用一種藥物處理5株細胞的價格,詳細情況請來電咨詢。
3. 貴公司的細胞增殖檢測服務只能用MTT法檢測嗎？能否用其他檢測方法？
用MTT法，也可以用其他方法，價錢另計。
4. 藥物檢測時，每種細胞株的一般采用幾個平行？對照又是怎么處理的，以及相應采用幾個平行？
藥物實驗每個濃度一般做3個平行，對照也保證有一定的復孔數。
