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RNA干擾服務(RNAi)-RNA干擾載體構建RNA干擾服務（RNAi） 世聯(lián)博研生命科學服務中心提供RNA干擾服務（RNAi）。RNA干擾（RNA interfering）現(xiàn)象是由與靶基因序列同源的雙鏈RNA引發(fā)的廣泛存在于生物體內(nèi)的序列te異性基因轉錄后的沉默過程。由于RNAi具有高度的序列專一性，可以te異地將te定的基因沉默，從而獲得基因基因功能喪失或基因表達量的降低。因此可以作為功能基因組學研究的一種強有力的工具。RNAi技術可以廣泛應用到包括功能學，藥物靶點篩選，細胞新華傳導通路分析，疾病治療等。 服務內(nèi)容 RNAi服務包括以下兩個方面： （1）化學合成RNAi服務 ①RNAi雙鏈設計：客戶需要與我們共同討論實驗方案，并提供靶基因的名稱、序列或GeneBank ID等 ②siRNA合成 ③根據(jù)客戶要求可進一步轉染哺乳動物細胞 ④檢測抑制效果：熒光定量PCR檢測mRNA表達情況、Western Blot檢測蛋白表達情況 ⑤提供實驗報告：siRNA序列、構建載體的測序報告；熒光定量PCR檢測報告、Western Blot圖片等 （2）載體介導的RNAi服務 ①shRNA設計：客戶需要與我們共同討論實驗方案，并提供靶基因名稱、序列或GeneBank ID等 ②shRNA構建 ③shRNA載體的選擇，提供pGPU6/GFP/Neo、pGPH1/GFP/Neo等多種載體 ④根據(jù)客戶要求可進一步轉染哺乳動物細胞 ⑤檢測抑制效果：熒光定量PCR檢測mRNA表達情況、Western Blot檢測蛋白表達情況 ⑥提供實驗報告：shRNA序列、構建載體的測序報告；熒光定量PCR檢測報告、Western Blot圖片等 收費標準
服務周期 一般為4周左右，具體視實驗情況而定。 客戶須知（對材料的要求、注意事項） 客戶需要提供RNA干擾的目的基因的名稱、序列或Gene Bank號，并與我們共同討論實驗方案。 服務程序 1. 可在我公司網(wǎng)站內(nèi)直接填寫《RNA干擾服務訂單》發(fā)至我公司郵箱。 2. 可下載訂單，填寫完成后，用傳真的形式發(fā)到我公司。 3. 可電話聯(lián)系詳談有關具體要求和服務內(nèi)容。 4. 簽訂《RNA干擾服務合同》，預付實驗總費用的50%作為實驗預付款。 5. 寄送：委托單位的試驗材料和試劑等均須采用te快專遞形式郵寄，有低溫要求的、固定要求的，按低溫保存、固定防碎方法運輸，以確保實驗物品的安可靠。 6. 實驗結束后，本公司將結果及時發(fā)給客戶，同時根據(jù)客戶要求處理相關材料： siRNA/shRNA序列； 構建的載體以及測序報告； 熒光定量PCR檢測報告/Western blot檢測報告等； 具體實驗方法、步驟、所用試劑、儀器，及相關分析數(shù)據(jù)等，實驗結果將以電子或書面形式提交給您。 7. 客戶應對所提供的材料及信息負責，如因客戶提供的材料及信息不準確而引起的實驗延誤或經(jīng)濟損失由客戶承擔。 服務項目簡介 RNA干擾(RNA interference, RNAi)是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈RNA(double-stranded RNA, dsRNA)誘發(fā)的、同源mRNA高效te異性降解的現(xiàn)象。RNAi的作用提供了一種經(jīng)濟、快捷、高效的抑制te異基因表達的技術手段，有助于研究該基因在生物模型系統(tǒng)中的作用，是研究基因功能的重要工具，并且逐步成為病毒性疾病、遺傳性疾病以及腫瘤等的基因治療研究的一種手段。可用于功能基因組學、基因治療、藥物靶標篩選、細胞信號傳導通路分析、蛋白質相互作用等研究。世聯(lián)博研生命科學服務中心RNAi服務團隊擁有專業(yè)的技術服務，能夠幫助客戶大化實現(xiàn)RNAi技術應有的價值，避免一些實驗錯誤。我們的研究隊伍將和您一起設計更加廣泛有效的RNAi解決方案。 應用領域 ① 基因功能的研究 ② 疾病的基因治療 ③ 蛋白質功能的研究 FAQ: 公司每個基因敲除共設計幾個干擾siRNA/shRNA？ 3個 敲除服務結束后，公司是否提供構建好的，能成功敲除的siRNA或者shRNA克隆？ 提供 是否保證敲除成功，不成功不收費？ 我們保證實驗不成功不收費 RNAi干擾服務中，干擾的效率一般有多少？ 干擾的效率一般能達到70% 我們需要提供什么信息用于siRNA的合成？你們可以幫助免費設計嗎？我們可以為您免費設計并合成siRNA 你們提供的siRNA是怎樣裝運的？如果在常溫下放置了一個星期，還有效嗎？我們提供的siRNA為干粉，可以常溫運輸，但要注意不能受RNA酶降解 使用RT-PCR檢測基因knockdown結果，之前應該注意哪些問題？ 要注意以下幾點問題： 1、我們RT-PCR的引物應該設計在target位置的兩側，而不是同側。目前已經(jīng)知道的siRNA介導的基因knockdown機制是RSIC先介導靶mRNA的切割，切割導致靶mRNA的降解，由于切割和降解可能具有不同的時間點，因此，設計于同側的PCR引物可能導致假陰性結果或knockdown效率的低估。 2、另外，RT-PCR結果會因為靶基因mRNA降解時間不同、細胞內(nèi)靶基因mRNA豐度不同而導致假陰性結果，te別對于豐度較高的基因，使用的檢測方式包括定量PCR、Northern檢測、western檢測等。這些方法會更加真實的反映RNAi的結果。 |
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