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原核表達(dá)質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)原核表達(dá)質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù) 世聯(lián)博研生命科學(xué)服務(wù)中心提供you質(zhì)的原核表達(dá)質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)。大腸桿菌(E. coli)作為蛋白表達(dá)系統(tǒng)，具有兩個(gè)顯著特征：操作簡(jiǎn)單，可在廉價(jià)的培養(yǎng)基中高密度生長(zhǎng)。它的這些特征使其在科研應(yīng)用中成為高效表達(dá)異源蛋白常用的原核表達(dá)系統(tǒng)。 服務(wù)范圍 1. 世聯(lián)博研生命科學(xué)服務(wù)中心有自己的質(zhì)粒載體庫(kù)，以及Clontech、Invitrogen、Stratagen、Novagen、Promega、Amersham等公司的質(zhì)粒載體。均為實(shí)驗(yàn)室常用質(zhì)粒載體。 如有需要，請(qǐng)聯(lián)系我們。 2. 世聯(lián)博研生命科學(xué)服務(wù)中心為客戶構(gòu)建或you化改造te定的載體，將目的基因裝載到te定的載體上，同時(shí)根據(jù)客戶需要，對(duì)載體進(jìn)行you化（包括啟動(dòng)子you化、篩選標(biāo)記you化、其它調(diào)控元件you化、密碼子you化以及表達(dá)you化篩選等），使得到的載體更適合蛋白表達(dá)與大腸桿菌內(nèi)其他操作。 收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)
服務(wù)周期 1. 30個(gè)工作日左右，具體視客戶要求以及載體類型而定。 2. 如客戶需表達(dá)重組蛋白，詳情請(qǐng)查看蛋白質(zhì)表達(dá)服務(wù)，服務(wù)周期根據(jù)其蛋白表達(dá)純化的具體情況而定，請(qǐng)來(lái)電咨詢。 客戶須知（對(duì)材料的要求、注意事項(xiàng)） 1. 客戶需提供目的基因的名稱及基因序列，以及包含有目的基因的質(zhì)粒。如有引物也可提供，或者由公司代合成，費(fèi)用另計(jì)。客戶也可提供載體，常用載體世聯(lián)博研生命科學(xué)服務(wù)中心免費(fèi)提供。 2. 本公司在收到客戶提供的材料信息后的弟二個(gè)工作日起開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。 服務(wù)程序 1. 可在我公司網(wǎng)站內(nèi)直接填寫(xiě)《原核表達(dá)質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)訂單》發(fā)至我公司郵箱。 2. 可下載訂單，填寫(xiě)完成后，用傳真的形式發(fā)到我公司。 3. 可電話聯(lián)系詳談?dòng)嘘P(guān)具體要求和服務(wù)內(nèi)容。 4. 簽訂《原核表達(dá)質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)合同》，預(yù)付實(shí)驗(yàn)總費(fèi)用的50%作為實(shí)驗(yàn)預(yù)付款。 5. 寄送：委托單位的試驗(yàn)材料和試劑等均須采用te快專遞形式郵寄，有低溫要求的、固定要求的，按低溫保存、固定防碎方法運(yùn)輸，以確保實(shí)驗(yàn)物品的安可靠。 6. 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，本公司將結(jié)果及時(shí)發(fā)給客戶，同時(shí)根據(jù)客戶要求處理相關(guān)材料 原核表達(dá)載體； 構(gòu)建好的重組質(zhì)粒1μg； 含有重組質(zhì)粒的表達(dá)保種菌； 電泳圖譜，測(cè)序圖譜以及酶切圖以及完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告。 B. 對(duì)于原核表達(dá)載體you化服務(wù)，我們提供： 原核表達(dá)載體； 載體改造后目的基因的測(cè)序結(jié)果，質(zhì)粒1ug以及含有重組質(zhì)粒的甘油菌； 完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告。 7. 客戶應(yīng)對(duì)所提供的材料及信息負(fù)責(zé)，如因客戶提供的材料及信息不準(zhǔn)確而引起的實(shí)驗(yàn)延誤或經(jīng)濟(jì)損失由客戶承擔(dān)。 服務(wù)咨詢及技術(shù)支持 ·電話: ·Email: SLBY800@163.COM 服務(wù)項(xiàng)目簡(jiǎn)介 大腸桿菌(E. coli)作為表達(dá)載體，具有兩個(gè)顯著特征：操作簡(jiǎn)單，可在廉價(jià)的培養(yǎng)基中高密度生長(zhǎng)。它的這些特征使其在科研應(yīng)用中成為 高效表達(dá)異源蛋白常用的原核表達(dá)系統(tǒng)。 盡管大腸桿菌有眾多的you點(diǎn)，但并非每一種基因都能在其中高效表達(dá)。這歸因于每種基因都有其te的結(jié)構(gòu)、 mRNA的穩(wěn)定性和翻譯 效率、蛋白質(zhì)折疊的難易程度、宿主細(xì)胞蛋白酶對(duì)蛋白質(zhì)的降解、外源基因和E. coli在密碼子偏好 性上的主要差別以及蛋白質(zhì)對(duì)宿主的潛在毒性等等。 服務(wù)項(xiàng)目 1. 質(zhì)粒載體庫(kù) 原核表達(dá)、酵母表達(dá)載體、哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)載體等；Clontech、Invitrogen、Stratagen 、Novagen、Promega、Amersham等公司的質(zhì)粒載體。 2. 載體構(gòu)建及you化 （1）啟動(dòng)子you化
（2） 篩選標(biāo)記you化 對(duì)載體上的Amp抗性、Kan抗性、Tet抗性及LacZ等地改造 （3） 其他調(diào)控元件you化 SD序列、起始密碼子、GC含量、RNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)、目的蛋白的大小等，皆需考慮。 （4） 密碼子you化 E.coli不常用的密碼子
經(jīng)過(guò)以上you化，得到的載體更適于蛋白表達(dá)與大腸桿菌內(nèi)其他操作。將克隆的目的基因插入原核表達(dá)載體后，導(dǎo)入大腸桿菌用于表 達(dá)目的蛋白。原核蛋白表達(dá)系統(tǒng)是迄今為止為成熟可靠的蛋白表達(dá)系統(tǒng)，能快速表達(dá)各種不同來(lái)源蛋白。所制備的重組蛋白可用 于藥物篩選、結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究、細(xì)胞生物學(xué)研究、蛋白質(zhì)組學(xué)研究等的一系列領(lǐng)域。 FAQ（Frequently Asked Questions） 1. 原核表達(dá)載體的選擇上有什么要求嗎？ 用什么樣的原核表達(dá)載體，應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：1.載體的多克隆位點(diǎn)是否有與您目的片斷相同的酶切位點(diǎn)，且您的目的片斷插入后是否會(huì)產(chǎn)生移碼突變；2.您是否有相應(yīng)的載體及其表達(dá)宿主菌；3.您準(zhǔn)備采用什么方法純化目的蛋白，因不同載體表達(dá)蛋白后的純化方法并不一樣。 2. 原核表達(dá)載體構(gòu)建完成后，貴公司提供哪些結(jié)果？ 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，本公司將結(jié)果及時(shí)發(fā)給客戶，同時(shí)根據(jù)客戶要求處理相關(guān)材料：原核表達(dá)載體；構(gòu)建好的重組質(zhì)粒1μg；含有重組質(zhì)粒的表達(dá)保種菌；電泳圖譜，測(cè)序圖譜以及酶切圖以及完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告。 3. 原核表達(dá)載體構(gòu)建客戶需要提供目的基因么？ 客戶需提供目的基因的名稱及基因序列，以及包含有目的基因的質(zhì)粒。
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