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文庫(kù)構(gòu)建服務(wù) 世聯(lián)博研生命科學(xué)服務(wù)中心提供文庫(kù)構(gòu)建服務(wù)。世聯(lián)博研生命科學(xué)服務(wù)中心提供的文庫(kù)構(gòu)建服務(wù)包括cDNA文庫(kù)構(gòu)建和基因組DNA文庫(kù)構(gòu)建,cDNA文庫(kù)來(lái)源于 細(xì)胞表達(dá)出的RNA,反映基因組表達(dá)的基因序列信息,用于研究te定細(xì)胞中基因的表達(dá)狀態(tài)和表達(dá)基因的功能等;基因組DNA文庫(kù)來(lái) 源于基因組DNA,反映基因組的部信息,用于基因組物理圖譜的構(gòu)建,基因組序列分析,基因在染色體上的定位,基因組中基因的 結(jié)構(gòu)和組織形式等。世聯(lián)博研生命科學(xué)服務(wù)中心將會(huì)為您在文庫(kù)構(gòu)建服務(wù)方面提供方位,性?xún)r(jià)比高的解決方案。 收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)
服務(wù)周期 實(shí)驗(yàn)周期一般為得到合格的Total RNA后30~45個(gè)工作日。如有te殊情況我們與客戶及時(shí)聯(lián)系反饋意見(jiàn)。 客戶須知(對(duì)材料的要求、注意事項(xiàng)) 1. 客戶須在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前確保其提供材料的數(shù)量和質(zhì)量,并提供相關(guān)信息。 服務(wù)程序 1. 可在我公司網(wǎng)站內(nèi)直接填寫(xiě)《文庫(kù)構(gòu)建服務(wù)訂單》發(fā)至我公司郵箱。
,以確保實(shí)驗(yàn)物品的安可靠。
服務(wù)咨詢(xún)及技術(shù)支持 電話: 服務(wù)項(xiàng)目簡(jiǎn)介 1. 普通cDNA文庫(kù)(質(zhì)粒文庫(kù)、噬菌體文庫(kù))構(gòu)建 用Oligo(dT)或隨機(jī)引物作逆轉(zhuǎn)錄引物,將合成的cDNA連接到適當(dāng)?shù)妮d體中獲得cDNA文庫(kù)。
(2)cDNA條鏈的合成。 (3)cDNA弟二條鏈的合成。 (4)雙鏈cDNA的修飾。探針標(biāo)記技術(shù):標(biāo)記物有放射性和非放射性?xún)煞N。非放射性:生物素、地高辛素、熒光素 標(biāo)記方法:切口平 移法、隨機(jī)引物法、末端標(biāo)記法、單鏈DNA探針標(biāo)記、寡核苷酸探針標(biāo)記法。 (5)雙鏈cDNA的分子克隆。
基于雙鏈te異性核酸酶(Duplex-Specific Nuclease, DSN)的cDNA文庫(kù)均一化技術(shù)構(gòu)建均一化cDNA文庫(kù),能減低高豐度表 達(dá)基因100倍以上,有效富集低豐度表達(dá)基因。
3. 長(zhǎng)文庫(kù)構(gòu)建
豐度基因;長(zhǎng)比例高(長(zhǎng)比例>80%);樣品用量大,需要25 mg的mRNA,因此,不適合樣品量少的材料。
可以為您提供從總 DNA 提取、隨機(jī)剪切、載體連接、轉(zhuǎn)化、擴(kuò)增到保存的程服務(wù)。同時(shí),還可以為您作進(jìn)一步的數(shù)據(jù)處理及信息 分析。
轉(zhuǎn)化受體菌形成重組DNA克隆群,這樣包含著細(xì)胞部mRNA信息去除了內(nèi)含子的cDNA克隆集合稱(chēng)為該組織或細(xì)胞的cDNA文庫(kù),具有 組織或細(xì)胞te異性。
chromosome)庫(kù)中篩選相對(duì)應(yīng)的克隆。YAC庫(kù)的嵌合性嚴(yán)重且操作難度較大,已逐步為PAC庫(kù)和BAC庫(kù)取代。PAC系統(tǒng)是以噬菌體P1為 基礎(chǔ)的克隆系統(tǒng),它可容納70~100 kb的插入片段,并可選擇性地區(qū)分重組子和非重組子,且同時(shí)有兩套復(fù)制機(jī)制。單拷貝復(fù)制子 可用于穩(wěn)定克隆增殖,而多拷貝復(fù)制子則可在Lac操縱子的控制下用于DNA的制備。BAC系統(tǒng)是基于大腸桿菌中可大容量容納基因且穩(wěn) 定性良好的F因子衍生而來(lái)的載體系統(tǒng),可容納超過(guò)100 kb的插入片段,BAC克隆的插入片段的平均長(zhǎng)度為120 kb,大可達(dá)到240 kb左右。良好的穩(wěn)定性和操作的簡(jiǎn)便性是BAC系統(tǒng)的主要you點(diǎn)。由這些克隆入手,采用依賴(lài)于適當(dāng)cDNA文庫(kù)的方法、依賴(lài)于特征序列 的方法或依賴(lài)于表達(dá)性質(zhì)等方法獲得候選cDNA。
組序列分析,基因在染色體上的定位,基因組中基因的結(jié)構(gòu)和組織形式等。我公司利用基因組散彈法文庫(kù)的成熟技術(shù),構(gòu)建基因組 文庫(kù),并保證庫(kù)容量和重組率。 應(yīng)用領(lǐng)域 ① 基因分離研究
FAQ 各種文庫(kù)構(gòu)建的價(jià)格差得比較多,均一化cDNA文庫(kù)構(gòu)建是什么技術(shù)?主要是用來(lái)做什么的? 我們基于雙鏈te異性核酸酶(Duplex-Specific Nuclease,DSN)的方法來(lái)構(gòu)建均一化cDNA文庫(kù),能減低高豐度表達(dá)基因100倍以 上,有效富集低豐度表達(dá)基因。均一化cDNA文庫(kù)是克服基因轉(zhuǎn)錄水平上巨大差異給文庫(kù)篩選和分析帶來(lái)障礙的有效措施,有利于研 究基因的表達(dá)和序列分析。 各種文庫(kù)構(gòu)建的載體分別是何種載體? cDNA文庫(kù)構(gòu)建使用的載體很廣泛,除常用質(zhì)粒和λ噬菌體載體外,我公司也可以使用客戶要求或提供的載體構(gòu)建所需cDNA文庫(kù)。 構(gòu)建文庫(kù)有沒(méi)有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)? cDNA文庫(kù)質(zhì)量的評(píng)價(jià)主要有兩個(gè)方面,一個(gè)是文庫(kù)的代表性,也就是指包含的重組cDNA反應(yīng)來(lái)源細(xì)胞中表達(dá)信息的完整性;另一個(gè) 是文庫(kù)的庫(kù)容量,它是指構(gòu)建的原始cDNA文庫(kù)中所包含的立的重組子克隆數(shù)。
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