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文庫構建服務

世聯博研生命科學服務中心提供文庫構建服務。世聯博研生命科學服務中心提供的文庫構建服務包括cDNA文庫構建和基因組DNA文庫構建，cDNA文庫來源于

細胞表達出的RNA，反映基因組表達的基因序列信息，用于研究te定細胞中基因的表達狀態和表達基因的功能等；基因組DNA文庫來

源于基因組DNA，反映基因組的部信息，用于基因組物理圖譜的構建，基因組序列分析，基因在染色體上的定位，基因組中基因的

結構和組織形式等。世聯博研生命科學服務中心將會為您在文庫構建服務方面提供方位，性價比高的解決方案。

收費標準

服務周期

實驗周期一般為得到合格的Total RNA后30~45個工作日。如有te殊情況我們與客戶及時聯系反饋意見。

客戶須知（對材料的要求、注意事項）

1. 客戶須在實驗開始前確保其提供材料的數量和質量，并提供相關信息。
2. 客戶需提供盡量多的新鮮樣品 （動物樣品量大于5 g；植物樣品量大于20 g；各種培養細胞提供5×107以上培養好的細胞)，樣品4 ℃保存不超過一天，或將新鮮樣品立即存于液氮或-80℃后保存不超過一個星期。
3. 可直接提供Total RNA或基因組DNA，要保證沒有降解，要求總RNA＞500ug，濃度＞1ug/ul；mRNA＞3ug，濃度＞50ng/ul；OD260/OD280值≥1.8，以我公司電泳膠圖、紫外分析儀定量檢測為準。
4. 建議由我方提取RNA或基因組DNA；如果客戶提供RNA樣品或基因組DNA，由樣品質量產生的任何問題，其損失和責任應由樣品提供方承擔。

服務程序

1. 可在我公司網站內直接填寫《文庫構建服務訂單》發至我公司郵箱。

2. 可下載訂單，填寫完成后，用傳真的形式發到我公司。

3. 可電話聯系詳談有關具體要求和服務內容。

4. 簽訂《文庫構建服務合同》，預付實驗總費用的50%作為實驗預付款。

5. 寄送：委托單位的試驗材料和試劑等均須采用te快專遞形式郵寄，有低溫要求的、固定要求的，按低溫保存、固定防碎方法運輸

，以確保實驗物品的安可靠。

6. 實驗結束后，本公司將結果及時發給客戶，同時根據客戶要求處理相關材料：

產物電泳圖譜；
cDNA初始庫/基因組DNA文庫，保存在-20 ℃；
文庫評價數據，包括庫容量，插入片段平均長度，重組效率，cDNA完整性評價等；
實驗報告（包括實驗流程，材料和方法等）。

7. 客戶應對所提供的材料及信息負責，如因客戶提供的材料及信息不準確而引起的實驗延誤或經濟損失由客戶承擔。

服務咨詢及技術支持

電話:

服務項目簡介

1. 普通cDNA文庫（質粒文庫、噬菌體文庫）構建

用Oligo(dT)或隨機引物作逆轉錄引物，將合成的cDNA連接到適當的載體中獲得cDNA文庫。

（1）Total RNA的提取和mRNA的純化。

（2）cDNA條鏈的合成。

（3）cDNA弟二條鏈的合成。

（4）雙鏈cDNA的修飾。探針標記技術：標記物有放射性和非放射性兩種。非放射性：生物素、地高辛素、熒光素 標記方法:切口平

移法、隨機引物法、末端標記法、單鏈DNA探針標記、寡核苷酸探針標記法。

（5）雙鏈cDNA的分子克隆。

（6）cDNA文庫的擴增。

（7）cDNA文庫鑒定評價。

2. 均一化文庫構建

均一化cDNA文庫是克服基因轉錄水平上巨大差異給文庫篩選和分析帶來障礙的有效措施，有利于研究基因的表達和序列分析。我們

基于雙鏈te異性核酸酶（Duplex-Specific Nuclease， DSN）的cDNA文庫均一化技術構建均一化cDNA文庫，能減低高豐度表

達基因100倍以上，有效富集低豐度表達基因。

文庫特點：無需反復雜交過程，均一化程度高；均一化后平均插入片斷大小無明顯變化。

3. 長文庫構建

利用公司專有技術，進行長文庫構建服務。尤其適合希望獲得高比例長基因的客戶。 文庫特點：不經過PCR過程，容易獲得低

豐度基因;長比例高（長比例>80%）；樣品用量大，需要25 mg的mRNA，因此，不適合樣品量少的材料。

4. 基因組DNA文庫構建

公司具備構建以 puc 19 作為載體的基因組散彈法文庫的成熟技術，擁有超聲儀、電轉儀等配套儀器、有秀的專業技術人員，

可以為您提供從總 DNA 提取、隨機剪切、載體連接、轉化、擴增到保存的程服務。同時，還可以為您作進一步的數據處理及信息

分析。

技術原理

cDNA文庫是在te定的組織或細胞中，以mRNA為模板逆轉錄形成的互補DNA（cDNA）與適當的載體（常用噬菌體或質粒載體）連接后

轉化受體菌形成重組DNA克隆群，這樣包含著細胞部mRNA信息去除了內含子的cDNA克隆集合稱為該組織或細胞的cDNA文庫，具有

組織或細胞te異性。

從YAC(yeast artificial chromosome)庫，或從BAC(bacterial artificial chromosome)庫、PAC(P1 artificial

chromosome)庫中篩選相對應的克隆。YAC庫的嵌合性嚴重且操作難度較大，已逐步為PAC庫和BAC庫取代。PAC系統是以噬菌體P1為

基礎的克隆系統，它可容納70～100 kb的插入片段，并可選擇性地區分重組子和非重組子，且同時有兩套復制機制。單拷貝復制子

可用于穩定克隆增殖，而多拷貝復制子則可在Lac操縱子的控制下用于DNA的制備。BAC系統是基于大腸桿菌中可大容量容納基因且穩

定性良好的F因子衍生而來的載體系統，可容納超過100 kb的插入片段，BAC克隆的插入片段的平均長度為120 kb，大可達到240

kb左右。良好的穩定性和操作的簡便性是BAC系統的主要you點。由這些克隆入手，采用依賴于適當cDNA文庫的方法、依賴于特征序列

的方法或依賴于表達性質等方法獲得候選cDNA。

基因組文庫是含有某種生物體部基因的隨機片段的重組DNA克隆群體。反應基因組的部信息，用于基因組物理圖譜的構建，基因

組序列分析，基因在染色體上的定位，基因組中基因的結構和組織形式等。我公司利用基因組散彈法文庫的成熟技術，構建基因組

文庫，并保證庫容量和重組率。

應用領域

① 基因分離研究

② 個體發育研究

FAQ

各種文庫構建的價格差得比較多，均一化cDNA文庫構建是什么技術？主要是用來做什么的？

我們基于雙鏈te異性核酸酶（Duplex-Specific Nuclease，DSN）的方法來構建均一化cDNA文庫，能減低高豐度表達基因100倍以

上，有效富集低豐度表達基因。均一化cDNA文庫是克服基因轉錄水平上巨大差異給文庫篩選和分析帶來障礙的有效措施，有利于研

究基因的表達和序列分析。

各種文庫構建的載體分別是何種載體？

cDNA文庫構建使用的載體很廣泛，除常用質粒和λ噬菌體載體外,我公司也可以使用客戶要求或提供的載體構建所需cDNA文庫。

構建文庫有沒有質量標準？

cDNA文庫質量的評價主要有兩個方面，一個是文庫的代表性，也就是指包含的重組cDNA反應來源細胞中表達信息的完整性；另一個

是文庫的庫容量，它是指構建的原始cDNA文庫中所包含的立的重組子克隆數。